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HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH 7.2 - 7.4
范圍內具有較好的緩沖能力。其大優點是在開放式培養或細胞觀察時能維持較恒定的PH值.在這種培養條件下,細胞培養瓶的蓋子應擰緊,以防止培養液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中.大多數培養液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養液呈橙黃色,堿性培養液呈深紅色.HEPES有些昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒.
原則上,HEPES作為緩沖劑可用來代替碳酸氫鹽，以解除需要高濃度CO2培養環境的限制.實際操作中并非如此簡單.
溶解的CO2與碳酸氫鹽對良好的細胞生長也是很重要的。
HEPES使用方法有兩種：
(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養液中,再過濾除菌.每1000ml培養液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH
調pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10 mmol/L.
(2)亦可配成 100 x 貯存液（l mol/L），使用前取
99ml培養液加入 lml貯存液，終應用濃度仍為10mmol/L。l mol/L（100 x）HEPES貯存液配制方法:取23.8g
HEPES溶于90ml雙蒸水中,用lN
NaOH調pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.
本產品采用細胞培養級的HEPES原料，為已經配好的1M溶液，無菌過濾。可以直接使用。 |
